வணிக ரீதியாக கிடைக்கக்கூடிய DNA குளோனிங் கருவிகள் வழக்கமான DNA லிகேஸ்களின் பயன்பாடு தேவையில்லாத மற்றொரு கட்டுப்படுத்தல் முறைகளைப் பயன்படுத்துகின்றன. இந்த முறைகள் குளோனிங் மிகவும் விரைவாக செய்ய அனுமதிக்கின்றன, கூடுதலாக குளோன் செய்யப்பட்ட DNA செருகலை தனித்துவமான திசையன்களுக்கு செருகுவதை அனுமதிக்கிறது. இந்த முறைகள் குறிப்பாக வடிவமைக்கப்பட்ட திசையன்கள் மற்றும் கூறுகளின் பயன்பாடு தேவைப்படுகிறது, மேலும் நெகிழ்வுத்தன்மையைக் கொண்டிருக்கவில்லை.
டோபோயோசோமரேஸ்-மத்தியஸ்தம்
டோபோயோசோமரேஸை கட்டுப்படுத்துவதற்கு ligase பயன்படுத்தலாம், மேலும் திசையன் அல்லது செருகலின் வரம்பு செரிமானம் தேவையில்லாமல் குளோனிங் மிக விரைவாக செய்யப்படலாம். இதில் TOPO குளோனிங் நடவடிக்கை ஒரு நேரியலாக்கும் திசையன் நான் டோபோய்சோமரேஸான அதன் முனைகள் இணைந்துகொள்ளும் ஆல் செயல்படுத்தப்படுகிறது, இந்த "டோபோ செயற்படுத்தப்பட்ட" திசையன் இன் ஒரு ஏற்க கூடும் PCR 5 'முனைகளிலும் இருவருக்கும் ligating மூலம் தயாரிப்பு PCR தயாரிப்பு, டோபோயோசோமரேஸ் வெளியிடப்படுகிறது மற்றும் செயலில் ஒரு வட்ட திசையன் உருவாகிறது.
படம் 092A | 9. கோடெசைட்டுகள் / கோடேவைரியன்கள் தயாரித்தல். செல்கள் / விரியன்களை ஒரு எஃப்எஸ்எல் கரைசலுடன் (1 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட எஃப்எஸ்எல்களைக் கொண்டவை) கலந்து 10-120 நிமிடங்கள் 37 ° சி வெப்பநிலையில் (அல்லது 4 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில்) அடைகாக்கும். கட்டுமானங்கள் தன்னிச்சையாக சவ்வுடன் இணைக்கப்படும், மேலும் படிகள் தேவையில்லை. | Xiphiaz / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Preparation_of_kodecytes_and_kodevirions.svg) from Wikimedia Commons
ஆசிரியர் : John Kaisermann
கருத்துகள்
கருத்துரையிடுக